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SPAdes安装及使用教程 ——基因组数据组装神器

  • 看不见的线
  • 308
  • 2024-01-10 09:17:59
  • 原创
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SPAdes(St. Petersburg genome assembler)是一个用于基因组组装的开源软件,主要应用于小型基因组如细菌,真菌等基因组测序数据的拼接。此软件应用广泛,具有多个附加管道可用于对不同类型的数据进行拼接。

metaSPAdes宏基因组数据集的管道
plasmidSPAdes用于从 WGS数据集中提取和组装质粒的管道
metaplasmidSPAdes用于从宏基因组数据集中提取和组装质粒的管道
rnaSPAdes来自 RNA-Seq数据的从头转录组组装器
biosyntheticSPAdes用于生物合成基因簇组装的模块
rnaviralSPAdes为 RNA病毒数据集(转录组、宏转录组和间病毒组)量身定制的从头组装器
coronaSPAdesrnaviralSPAdes 的一种特殊模式,专门针对 SARS-CoV-2从头组装
truSPAdes(已弃用)用于TruSeq条形码组件的模块

SPAdes的安装

  1. conda 安装

conda install -c bioconda spades

  1. 预编译可执行文件安装(下载并解压后即可使用)

#下载可执行文件并解压

wget http://cab.spbu.ru/files/release3.15.5/SPAdes-3.15.5-Linux.tar.gz

tar -xzf SPAdes-3.15.5-Linux.tar.gz

# 切换到bin目录

cd SPAdes-3.15.5-Linux/bin/

# 添加环境变量(临时)

export PATH=$PATH:$(pwd)

# 验证安装

spades.py --test

SPAdes的使用

单端测序数据

spades.py --careful --s1 R1.fastq -o result_out

双端测序数据

spades.py --careful --pe1-1 R1.fastq --pe1-2 R2.fastq -o result_out

宏基因组数据组装

spades.py --meta -t 16 -m 50 --pe1-1 R1.fastq --pe1-2 R2.fastq -o result_out

WGS数据质粒组装

spades.py --plasmid -t 16 -m 50 --pe1-1 R1.fastq --pe1-2 R2.fastq -o result_out

参数选项:

--s1:指定单独测序的序列文件,如果有多个文库,用数字后缀加以区分,比如--s1,--s2

--pe1-1和--pe1-2:分别指定双端测序的R1端和R2端序列文件,多个文库用数字后缀区分,比如--pe2-1, --pe2-2

-k:kmer数,一次可以输入多个,用逗号分隔,数值从小到大排列,kmer最大为127,数值必须是奇数,一般自动选择即可,--sc参数,则默认值为 21,33,55。若没有 --sc参数,则程序会根据 reads长度自动选择 k-mer参数

--careful:通过运行 MismatchCorrector模块进行基因组上 mismatches和 short indels的修正。推荐使用此参数

-o result_out:指定输出文件目录为result_out,需要提前设定,为必选项

--test:使用 test数据运行 SPAdes,用于检测软件是否正确安装

--meta:组装宏基因组数据集

--plasmid:从WGS数据集组装质粒

--metaplasmid:从宏基因组组装体中提取染色体外元素,如质粒

--help:打印帮助信息

-t 16:使用的线程数,默认为16

-m 250:设定内存的限制,单位为 Gb。如果程序使用的内存达到此值,则程序会终止运行。默认值是 250

参考资料:

Prjibelski A, Antipov D, Meleshko D, Lapidus A, Korobeynikov A. Using SPAdes De Novo Assembler. Curr Protoc Bioinformatics. 2020 Jun;70(1):e102. doi: 10.1002/cpbi.102. PMID: 32559359.

https://github.com/ablab/spades#metapv

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